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Registro Completo |
Biblioteca(s): |
Embrapa Cerrados; Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
Data corrente: |
18/08/2014 |
Data da última atualização: |
12/12/2023 |
Tipo da produção científica: |
Orientação de Tese de Pós-Graduação |
Autoria: |
GUIMARÃES, A. L. S. |
Título: |
Avaliação de diferentes sistemas de maturação para aumentar a competência de ovócitos bovinos. |
Ano de publicação: |
2013 |
Fonte/Imprenta: |
2013. |
Páginas: |
85 f. |
Idioma: |
Português |
Notas: |
Dissertação (Mestrado) - Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Universidade de Brasília, Brasília, DF. Orientadora: Margot Alves Nunes Dode, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
Conteúdo: |
O sucesso da utilização da maioria das técnicas de reprodução assistida (TRA) depende da disponibilidade de ovócitos saudáveis e no estágio adequado para seu uso. Como um dos fatores limitantes na utilização das TRAs é a disponibilidade de ovócitos competentes, é importante buscar alternativas para auxiliar esses ovócitos melhorando com isso a eficiência dessas técnicas. O objetivo deste trabalho foi testar dois diferentes sistemas de maturação, o sistema SPOM (Simulated Physiological Oocyte Maturation) e a retenção meiótica na presença de ITS (Insulina-transferrina-Selênio), para aumentar a competência do ovócito e consequentemente incrementar a produção de embriões in vitro. Os ovócitos foram obtidos de ovários de abatedouro, sendo que os provenientes de folículos de 1-3 mm foram dissecados da córtex ovariana e os de 3-8 mm, obtidos por punção folicular. Para a avaliação dos estágios de maturação nuclear, os ovócitos foram corados com lacmóide e para verificar o efeito dos sistemas de MIV na produção de embriões, foi avaliada a taxa de clivagem, blastocisto, tamanho dos embriões e número total de células. O corante azul de Trypan foi utilizado para verificar a viabilidade das células do cumulus após a retenção. Os dados de taxa de maturação nuclear e desenvolvimento embrionário foram avaliados pelo teste do ? 2 , e os dados referentes a tamanho e número de células pelo teste de Kruskar-Wallis. O primeiro sistema de maturação a ser testado foi o sistema SPOM em ovócitos de folículos aspirados, com a dose 0,01 UI/ml de FSH, utilizada na MIV convencional, onde as taxas de clivagem, D7 e D8 foram drasticamente reduzidas (P<0,05) quando comparadas com as do grupo controle. O aumento da dose de FSH para 0,1 UI/ml, no sistema SPOM, em ovócitos obtidos de folículos de 1-3 mm não aumentou a produção de embriões (P0<0,05), entretanto em ovócitos obtidos de folículos de 3-6 mm teve efeito prejudicial, sendo as taxas de clivagem e blastocistos inferiores (P<0,05) as do grupo controle Da mesma forma, quando o SPOM foi utilizado na presença de FSH recombinante (FRSr), de BSA como suplemento dos meios e o cultivo realizado sob baixa tensão de O2, uma redução (P<0,05) na taxa de blastocisto foi observada, mas o tamanho e número de células dos embriões foram semelhantes (P>0,05) aos do controle. A segunda alternativa testada foi o uso da cilostamida, inibidor da PDE3, e ITS no cultivo de pré-maturação por 8 e 24 horas. Na concentração de 20µM, a cilostamida reteve 91% dos ovócitos em VG por até 24 horas, entretanto o desenvolvimento embrionário destes embriões foi comprometido, com baixas taxas de clivagem e de embriões em D7 (P<0,05). Foi também avaliada a diminuição da concentração de cilostamida durante o bloqueio e a presença do ITS. Foi observado que a redução da concentração de cilostamida associada ao período menor de retenção causou um aumento da produção de blastocisto semelhante às taxas obtidas para o controle e que o ITS não afetou (P>0,05) à resposta dos ovócitos a retenção com cilostamida. Conclui-se que o sistema SPOM utilizando FSHr, BSA e baixa tensão de O2 afetou o desenvolvimento embrionário. Além disso, a cilostamida quando utilizada para bloquear a meiose tem efeito deletério nos ovócitos e células do cumulus se utilizada por 24 horas na concentração de 20 ?M. A menor concentração (10?M) e menor tempo de exposição (8 horas) pode amenizar esse efeito, mas também não causa nenhum incremento na produção de embriões. A presença de ITS durante o bloqueio não afeta a produção de embriões. Mais estudos devem ser realizados na tentativa de utilizar a retenção para incrementar a qualidade de ovócitos utilizados para as TRAs. MenosO sucesso da utilização da maioria das técnicas de reprodução assistida (TRA) depende da disponibilidade de ovócitos saudáveis e no estágio adequado para seu uso. Como um dos fatores limitantes na utilização das TRAs é a disponibilidade de ovócitos competentes, é importante buscar alternativas para auxiliar esses ovócitos melhorando com isso a eficiência dessas técnicas. O objetivo deste trabalho foi testar dois diferentes sistemas de maturação, o sistema SPOM (Simulated Physiological Oocyte Maturation) e a retenção meiótica na presença de ITS (Insulina-transferrina-Selênio), para aumentar a competência do ovócito e consequentemente incrementar a produção de embriões in vitro. Os ovócitos foram obtidos de ovários de abatedouro, sendo que os provenientes de folículos de 1-3 mm foram dissecados da córtex ovariana e os de 3-8 mm, obtidos por punção folicular. Para a avaliação dos estágios de maturação nuclear, os ovócitos foram corados com lacmóide e para verificar o efeito dos sistemas de MIV na produção de embriões, foi avaliada a taxa de clivagem, blastocisto, tamanho dos embriões e número total de células. O corante azul de Trypan foi utilizado para verificar a viabilidade das células do cumulus após a retenção. Os dados de taxa de maturação nuclear e desenvolvimento embrionário foram avaliados pelo teste do ? 2 , e os dados referentes a tamanho e número de células pelo teste de Kruskar-Wallis. O primeiro sistema de maturação a ser testado foi o sistema SPOM em ovócitos de ... Mostrar Tudo |
Palavras-Chave: |
Cilostamida; Cultivo de pré-maturação; Retenção meiótica; SPOM. |
Categoria do assunto: |
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Marc: |
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Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (CENARGEN) |
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Registros recuperados : 27 | |
12. | | GUIMARÃES, A. L. S.; CARVALHO, J. O.; LEME, L. O.; SPRÍCIGO, J. F. W.; PIVATO, I.; DODE, M. A. N. Efeito do cultivo in vitro no tamanho e sexo de embriões bovinos no D14 de desenvolvimento. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE TECNOLOGIA DE EMBRIÕES, 29., 2015, Gramado. Anais... [S.l.]: SBTE, 2015. p. 337.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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14. | | CUNHA, A. T. M.; CARVALHO, J. O.; GUIMARÃES, A. L. S.; LEMEID, L. O.; CAIXETA, F. M.; VIANA, J. H. M.; DODE, M. A. N. Bovine epididymal spermatozoa treatment for in vitro fertilization: Heparin accelerates fertilization and enables a reduction in coincubation time. PLoS ONE, v. 14, n. 1, article e0209692, 2019.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 1 |
Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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15. | | SPRÍCIGO, J. F. W.; SENA NETTO, S. B.; SIMOES, L. M. S.; LEME, L. O.; GUIMARÃES, A. L. S.; PIVATO, I.; DODE, M. A. N. Transferência intrafolicular de ovócitos imaturos: uma alternativa para a multiplicação de fêmeas bovinas. In: REUNIÃO ANUAL DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE TECNOLOGIA DE EMBRIÕES, 29., 2015, Gramado. Anais... [S.l.]: SBTE, 2015. p. 307.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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16. | | SPRÍCIGO, J. F. W.; GUIMARÃES, A. L. S.; CUNHA, A. T. M.; LEME, L. de O.; CARNEIRO, M. C.; FRANCO, M. M.; DODE, M. A. N. Using Cumulus Cell biopsy as a non-invasive tool to access the quality of bovine oocytes: how informative are they? Animals, v. 12, n. 22, 2022. 3113Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: A - 2 |
Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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18. | | SENA-NETTO, S. B.; SPRÍCIGO, J. F. W.; LEME, L. O.; GUIMARÃES, A. L. S.; CAIXETA, F. M. C.; DODE, M. A. N.; PIVATO, I. The replacement of fetal bovine serum with bovine serum albumin during oocyte maturation and embryo culture does not Improve blastocyst quality after slow freezing cryopreservation. Biopreservation and biobanking, v. 18, n. 3, p. 171-179, 2020.Tipo: Artigo em Periódico Indexado | Circulação/Nível: B - 1 |
Biblioteca(s): Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. |
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19. | | KAWAMOTO, T. S.; ZACARIAS, T. A.; GUIMARÃES, A. L. S.; SCALIANTE, J. R.; RODRIGUES, S. de A. D.; FIGUEIREDO, R. A. Serum FSH, AMH related to number and morphology of oocytes in superovulated 4 to 7 months old Nelore breed females (Bos Taurus Indicus). Animal Reproduction, v.14, n.3, p.757, jul./set. 2017. Proceedings of the 31st Annual Meeting of the Brazilian Embryo Technology Society (SBTE); Cabo de Santo Agostinho, PE, Brazil, August 17th to 19th, 2017. Abstracts.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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20. | | ZACARIAS, T. A.; GUIMARÃES, A. L. S.; SCALIANTE, J. R.; RODRIGUES, S. A. D.; DODE, M. A. N.; FIGUEIREDO, R. A. Hormonal stimulation in Nelore calves for in vitro embryo production. In: ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN EMBRYO TECHNOLOGY SOCIETY (SBTE), 29., 2015, Gramado.; MEETING OF THE EUROPEAN EMBRYO TRANSFER ASSOCIATION (AETE), 31, 2015, Ghent. Proceedings... Animal Reproduction., v.12, n.3, p. 546, Jul./Sept. 2015. A172. 1 CD-ROM.Tipo: Resumo em Anais de Congresso |
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